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L-色氨酸的比旋度测定

发表时间:2020-07-06  |  点击率:109

前言

 

L-色氨酸是人体和动物所必需的 8 种必需氨基酸之一,不能通过自身合成,只能通过食物来摄取。L-色氨酸又被称为第二必需氨基酸,目前广泛应用于医药、食品、饲料等方面。随着生产技术的不断进步,微生物法替代了传统的化学合成法和蛋白质水解法,占据了市场主导地位,主要产地集中在欧美、日本等少数地方。但目前在产业化生产 L-色氨酸的过程中,均会存留少量杂质,因此下游的分离纯化工艺非常重要。

比旋光度是旋光物质的重要物理常数,可以用来检测 L-色氨酸的纯杂程度,进而为提L-色氨酸的生产效率提供参考。

仪器与试剂

 

2.1 仪器

GP80全自动旋光仪

 

实验方法

 

3.1 实验步骤

(1) 色氨酸溶液

精准称取约 1.0g 色氨酸,加入适量水,在水浴(60℃)中温热溶解,定容至 100mL制成每 1 mL 约含 10mg 的溶液。

(2) 空白测试

将控温旋光管用三级水清洗 3 次以上,然后加满水至管路中无气泡。将旋光管水平放置于旋光仪中,连接温控线,设置温度 20℃,等待仪器温度稳定后,点击“清零”。

 

(3) 样品测试

将控温旋光管取出,用色氨酸溶液清洗 3 次以上,然后加满溶液至管路中无气泡。等待仪器温度稳定后,点击“测试”。

3.2 仪器参数

 

样品名称:色氨酸

测试次数:3

样品质量:0.99952g

显示位数:3

试管长度:10cm

结果类型:比旋度

温度:20

测量准确:高精度测量

结果与讨论

 

4.1 实验结果

 

编号

测试温度

比旋度

平均值

 

1

 

 

20

-32.085

 

 

 

-32.11

-32.135

-32.135

 

2

-32.135

-32.035

-32.135

4.2 讨论

两次平行的结果均符合药典中对于 L-色氨酸比旋度的要求(-30.0°~-32.5°),此实验能够L-色氨酸的纯度测定提供一定的依据。

参考文献

 

[1] 陈荣庆,刘伟,.L-色氨酸的研究进展[J].安徽农业科学,2014,(14):4438-4440,4443.

[2] 国家药典委员会.中华人民共和国药典[M].二部.北京:中国医药科技出版社,2015:388.

注意事项

 

1、本次实验所用试剂和水,在没有注明其他要求时,均指分析纯试剂和三级水。

2、色氨酸略溶于水(1.1g/100mL25℃),建议在水浴中温热溶解。建议先加入 50-60 mL 的水,搅拌溶解大部分样品,再添加少量水至样品全部溶解,再于冰水中冷却至 20℃。最后将样品液和清洗液全部转移至 100mL 容量瓶中,定容。也可使用超声波仪器加速溶解。

3、溶液配制好后建议在 30min 内测试完毕。

4、可通过旋光管两侧的透光玻璃孔观察管中是否有气泡,同时检查并擦净玻璃上的水渍和污迹。

5、为旋光管更换样品液时建议将仪器的温控关闭。操作方法是将参数设置里的“温度” 选项关闭。

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